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液相色谱实用技术-色谱柱的使用及保养
  • 资源类别:

    食品资料 - 食品检测

  • 资源大小:

    627 KB

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    PPT

  • 文件语言:

    简体中文

  • 更新时间:

    2018-4-9 23:36:55

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内容简介

错误?
色谱柱以外的因素(三)
实验的重复性差
梯度实验时平衡时间不足
温度波动
流动相组成改变
样品溶剂不同
样品稳定性不好
方法的开发不好
缓冲液的pH值不合适
缓冲液的缓冲能力不足
简单的判别方法
高的柱反压是否伴随着
保留时间变化?
峰形变坏?
分辨率变坏?
测量色谱系统的谱带展宽
典型的分析系统应远小于 100 微升
如大于此数应检查仪器系统
测量色谱系统的谱带展宽
卸下色谱柱,用UNION代替之
按测柱效方法,以1/10的样品浓度进样,大约2~5微升
用5 sigma方法测******%峰高处的峰宽:W
仪器参数∶
流速∶****** ml/min
纸速∶20 cm/min (用记录仪时,接检测器10mV档)
检测器灵敏度∶****** (用记录仪时)
检测器时间常数∶小于******
谱带展宽(ml) =1000×W(cm)/20 (记录仪) =1000×W(min) (工作站)
流动相及样品的预处理
液相色谱实用技术(二)
液相色谱对流动相的要求
除色谱柱对流动相对的要求外,还有∶
与检测器匹配
脱气
避免卤素离子(不锈钢系统)
溶剂的粘度
细菌的生长
流动相的脱气
流动相脱气的目的
使色谱泵的输液准确
输液均匀准确,并且脉动减小
保留时间及色谱峰面积的重现性提高
提高检测的性能
防止气泡引起的尖峰
基线稳定,信噪比增加
溶剂的紫外吸收本底降低
保护色谱柱
减少死体积
防止填料的氧化
流动相脱气的方法
加热
简单,如同抽真空一起使用,其效果很好。但容易造成流动相组成的变化
抽真空
同上,一般在溶剂抽滤的同时,也有脱气的效果
超声波
简单,但效果不理想。
通惰性气体(一般用氦气)
可保持连续脱气,多用于低压梯度
脱气机
可保持连续脱气,多用于低压梯度
样品的预处理
样品预处理的目的
除去微粒
减少干扰杂质
浓缩微量的组份
提高检测的灵敏度及选择性
改善分离的效果
有利于色谱柱及仪器的保护
样品的预处理重要性
占样品分析时间的比例
样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间
占分析的消耗总成本最大
消耗大量的溶剂及其他化学品
实验的重复性及准确性最差的环节
影响实验结果好坏的最重要因素
是决定性的步骤
……………………

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